Journal Home

  ISSN 0204-8043 (print)

  ISSN 1314-2143 (online)

Past Issues

NLRs CHALLENGE IMPACTS TIGHT JUNCTION CLAUDINS IN SERTOLI CELLS

 

Soren B. Hayrabedyan, Diana Y. Zasheva, Krassimira O. Todorova
Institute of Biology and Immunology of Reproduction, Bulgarian Academy of Sciences, Sofia, Bulgaria

 


ABSTRACT

 

Aim: The present study aims to investigate the NALP3 system and its effect on claudins in Sertoli cells using a mouse adult Sertoli cell line as a model. We focus on the Sertoli cell biology looking for the possible implications for male reproductive functions. Materials and methods: Adult Sertoli cells were transfected with NAPL3 siRNA and treated with NOD1 (ie-DAP) and NOD2 (MDP) receptor ligands. Two dimensional gel electrophoresis was performed on lysates of non-challenged and MDP-treated Sertoli cells. Results: There were positive claudin-5 and claudin-11 expression levels on transcript (RT-qPCR) levels. Specific protein spots in 2D gels were detected after bioinformatics analysis. This study demonstrates direct induction of tight-junction proteins probably favouring junction stability. Conclusions: The innate immunity and tight-junction pathway integration probably have a protective role for both blood-testis immune barrier and spermatogenesis compartmentalisation maintained by the very same barrier. This integration also points the way for mechanistic research of the disturbances inflicted during an inflammatory response in the testis niche.

 

Abstract in russian

РЕЗЮМЕ

 

Цель: Целью данного исследования является прослеживание воздействия системы NALP3 на клаудины в клетках Сертоли с применением мышиной линии клеток Сертоли взрослой особи в качестве модели. Основными целями исследования являются биология клеток Сертоли с предполагаемым значением для репродуктивных функций мужчин. Материалы и методы: Сертоли клетки взрослой особи были трансфицированы малой интерферирующей РНК-а от NAPL3 и обработаны с применением рецепторных лигандов NOD1 (ie-DAP) и NOD2 (MDP). Разделение протеинов в лизатах необработанных и обработанных посредством MDP Сертоли клеток проводили с помощью двумерного гель-электрофореза. Результаты: Установлена позитивная экспрессия клаудина 5 и клаудина 11 на уровне транскриптов (RT-qPCR). Специфические протеиновые пятна в двумерных гелях были детектированы после биоинформатического анализа. Исследование установило прямую индукцию протеинов плотных контактов по всей вероятности усиливающих стабильность межклеточных контактов. Выводы: Интеграция сигнальных путей врождённого иммунного ответа и плотных межклеточных контактов вероятно осуществляет протективную роль как в отношении гематотестикулярного барьера, так и в отношении компартментализации сперматогенеза, поддерживаемой тем же самым барьером. Данная компартментализация указывает также направление механистических исследований нарушений, вызванных воспалительными ответами в
области ниши стволовой клетки яичка.